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HE染色

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項目介紹

蘇木精 - 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。 蘇木精 染液為堿性 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色 ;伊紅為 酸性染料 ,主要使細胞質(zhì)和 細胞外基質(zhì) 中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué)、 胚胎學(xué) 、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。

樣品要求

1、樣品可為新鮮組織、細胞爬片、4%多聚甲醛固定的組織/細胞、蠟塊或OCT包埋包埋劑包好的細胞/組織,以及已經(jīng)做好切片的組織。

2、樣品類型不一樣,價格有所差異。(需要進行前處理,如需包埋、切片,則需收取前處理費用)

項目案例

HE染色(兔心?。?/p>

HE染色(腎小球)

HE染色(心梗)

常見問題
1、切片在脫蠟后出現(xiàn)大量白色斑點

(1)烤(烘)片溫度太低,玻片在脫蠟前沒有充分烤(烘)干—先用無水乙醇去除玻片上的水分,然后重新用二甲苯進行脫蠟處理。

(2)切片在二甲苯停留時間不足 或停留時間過久—切片需退回到二甲苯操作步驟,使其停留時間相對長些,或更換二甲苯,進行重新染色。

2、細胞核染色暗淡,即蘇木精染色太淡

(1)切片在蘇木精染色液停留時間太短

(2)蘇木精染色液過度氧化,失去染色能力,不能再繼續(xù)使用

(3)分化步驟時間過長。如果是骨組織細胞核暗淡,則多數(shù)是由于脫鈣過度造成。

改善方法:切片需重新染色,如果組織在固定液固定時間過長,細胞核染色能力將減弱,需增加其在蘇木精染色液的時間,或用一些方法增加組織的嗜堿性,以改善細胞核的著色。

3、細胞核過染,即蘇木精顏色過深,甚至蘇木精顏色的分布占據(jù)了細胞質(zhì)的位置

(1) 切片在蘇木精染色液停留時間過長

(2) 切片太厚

(3) 分化步驟時間過短

改善方式:如果切片不是因為太厚,對切片進行重新染色,對于染色和分化時間做出適當(dāng)?shù)卣{(diào)整;如果確定是由于切片太厚導(dǎo)致細胞核過染,則需要重新切片。

4、細胞核呈紅、棕色改變

蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足—每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發(fā)現(xiàn)氧化過度及時更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片足夠的藍化時間。

HE染色

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